293A细胞最初是从人类胚胎肾脏中分离出来的。该细胞系以荷兰莱顿大学的研究人员293号胎儿命名。使用腺病毒5型(Ad5)转化了这些细胞浮游微生物采样器,该病毒整合到细胞基因组中,赋予它们永生的能力。Ad5整合位点的突变阻碍了病毒E1A蛋白的表达,从而防止了病毒复制,允许293A细胞无限增殖。
293A细胞的特性永生化:293A细胞是永生化的细胞系,这意味着它们可以无限增殖,无需额外的生长因子或血清补充。这使得它们成为长期培养和实验应用的理想选择。
多功能性:293A细胞可以表达来自各种物种的异源蛋白。它们具有转染效率高,且能够产生高水平的外源蛋白。
复制缺陷型腺病毒载体:293A细胞是生成复制缺陷型腺病毒载体的常用细胞系。这些载体可用于将基因传递到目标细胞,使其成为基因治疗和基础研究的有力工具。
宿主因子:293A细胞表达多种宿主因子,包括受体、转运蛋白和酶。这使得它们可用于研究病毒感染、药物代谢和细胞信号传导等生物过程。
模型系统:293A细胞广泛用于构建模型系统浮游微生物采样器,以研究人类疾病和病毒感染。它们可被工程改造以模拟特定疾病状态或表达突变基因,从而提供对病理机制和治疗靶点的宝贵见解。
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293A细胞的应用293A细胞在生物医学研究领域具有广泛的应用,包括:
病毒学:研究病毒感染机制、开发抗病毒疫苗和药物。
免疫学:研究免疫细胞的功能、开发免疫疗法。
药理学:筛选和表征新药,研究药物作用机制。
蛋白质表达:表达和纯化用于研究和治疗的重组蛋白。
基因治疗:生成用于基因传递和疾病治疗的复制缺陷型腺病毒载体。
293A细胞培养和转染293A细胞通常在杜尔伯科培养基(DMEM)中培养,补充10%胎牛血清(FBS)。它们生长迅速,可达到高细胞密度。转染293A细胞可使用多种方法,包括脂质体转染、钙磷酸沉淀和电穿孔。选择最佳转染方法取决于所使用的DNA或RNA类型和所需的转染效率。
293A细胞的局限性尽管293A细胞具有广泛的应用浮游微生物采样器,但它们也有一些局限性。它们是一条非免疫源性细胞系,因此它们可能无法模拟人类免疫细胞的某些功能。它们可能缺少某些宿主因子,从而影响某些研究应用。研究人员应仔细考虑这些局限性,并在选择293A细胞或其他细胞模型时权衡其优点和缺点。
结论 293A细胞是一种多才多艺且宝贵的实验工具,已在生物医学研究中发挥了至关重要的作用。它们的永生化、多功能性和宿主因子表达使其成为病毒学、免疫学、药理学和蛋白质表达研究的理想选择。通过持续的研究和改进,293A细胞将继续是生物医学研究和药物开发领域不可或缺的一部分。